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叮!您的“酶聯免疫吸附”知識大禮包已到達!

更新時間:2023-11-20 點擊次數:178


01 什么是酶聯免疫吸附測定?

酶聯免疫吸附測定(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA),是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。自上世紀70年代初問世以來,發展迅速。 

ELISA是基于抗原-抗體的特異性結合反應建立起來的一種快速檢測技術, 它將酶促反應的高效率和免疫反應的高度專一性有機地結合起來,可對各種微量有機物含量進行測定。 


抗原、抗體小知識

抗原決定簇示意圖

抗原是能在機體中引起特異性免疫應答的物質??乖M入機體后,可刺激機體引起細胞免疫和產生抗體??乖姆磻匀Q于抗原決定簇。一個抗原分子可帶有不同的決定簇。

抗原抗體結合反應示意圖

抗體是指能與抗原特異性結合的免疫球蛋白。

抗原抗體的關系就如同特定的鑰匙和鎖,一一對應,只有找到正確的鑰匙--抗原才能打開對應的鎖---抗體。


02 酶聯免疫吸附試驗原理

image.png

1、使抗原或抗體結合在固相載體表面,并保持活性。

2、使抗體或抗原與某種酶連接成酶標記抗體或抗原。

3、在測定時,把受檢抗體(或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原(或抗體)一起反應。

4、采用洗滌的方法去除未結合的酶標抗原(或抗體),最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。

5、加入酶反應的底物后,底物被酶催化變為有色產物。

6、產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,可以根據顏色反應的深淺來進行定性或者定量分析。


03 酶聯免疫吸附試驗分類

 間接法(Indirect ELISA):

將已知抗原吸附于固相載體,酶標記二抗

檢測待測液體中未知抗體

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雙抗體夾心法(Sandwich ELISA):

將已知抗體吸附于固相載體,酶標記一抗

檢測待測液體中的可溶性抗原

image.png

競爭法(Competitive ELISA):

將已知抗體或抗原吸附于固相載體,酶標記抗原或抗體

檢測待測液體中的可溶性抗原或抗體

image.png


04 酶聯免疫吸附試驗的優勢

1、檢測速度快:可以制備成相應檢測試劑盒,多樣品同時檢測,大大縮短檢測時間。

2、特異性強:其利用抗原與抗體的特異性結合測定,具有選擇性高的特點。

3、靈敏度高:結果的準確性和方法的靈敏度與儀器分析方法一致。

4、操作簡單:不需要大型儀器設備,試劑盒可以直接處理,不需要二次加工。

5、便于推廣:對試驗人員的技術要求不高,便于技術推廣。


05 酶聯免疫吸附試驗的應用

由于酶聯免疫法具有快速、操作方便、靈敏度高的特點,適用于現場檢測,其應用范圍也在不斷擴大,目前已被廣泛應用于食品檢測醫學檢測中。在食品檢測中主要用于檢測植物性食品的農藥殘留、動物性食品的獸藥殘留、真菌毒素、食源性微生物及食品中特殊蛋白質、重金屬等。


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