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高純度RNase A純化工藝方案分享

更新時間:2023-11-27 點擊次數:103

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核糖核酸酶A

核糖核酸酶A(Ribonuclease A,縮寫RNase A),是一種含4個二硫鍵的單鏈多肽,分子量約為13.7kDa(氨基酸序列)。RNase A是一種核糖核酸內切酶(endoribonuclease)。


核糖核酸酶層析純化思路

提取及粗純方案

我們基本采用牛胰腺硫酸銨鹽析粗提物(由McDonald根據Kunitz氏純化方法修改,“Methods in Enzymology",Vol.ⅡP429,1955.)。


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結論:

通過對牛胰腺鹽析粗提物處理,上樣CM Tanrose 6FF進行RNase A的分離純化,其純度得到了很大的提升,去除了較多的雜蛋白,經后續一定的處理后,跑SDS-PAGE膠,凝膠成像儀分析顯示單一條帶,符合純化要求。

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